تسجيل الدخول

نسرين جهاد صدرالدين سدر

رسالة الدكتوراة

​ترتبط الأغشية الحيوية التي تشكلها البكتيريا الزنجارية والمكورات العقدية المقيحة بالعدوى المدمرة على وجه التحديد في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة. أثار ظهور مقاومة البكتيريا للأدوية المتعددة الحاجة الملحة إلى ايجاد دواء بديل للقضاء على عدوى الأغشية الحيوية. تم إثارة عسل النحل الماليزي اللاذع (Trigona) كغذاء محتمل مع أنشطة مضادة للبكتيريا ومضادات حيوية. ومع ذلك ، هناك معرفة محدودة حول تأثير عسل Trigona على التعبير الجيني في البكتيريا الانتهازية. ومن ثم ، كان الهدف من هذه الدراسة هو تقييم الخصائص الكيميائية النباتية لعسل Trigona وتحليل التعبيرعن مستوى الجينات المرتبطة بالأغشية الحيوية في P. aeruginosa و S. pyogenes بعد التعرض لعسل Trigona. تم فحص الخواص الكيميائية النباتية لعسل Trigona بواسطة طريقة Folin-Ciocalteu لتحديد المحتوى الفينولي الكلي (TPC) وتم تحديد النشاط المضاد للأكسدة عن طريق حساب التركيز المثبط نصف الأقصى (IC50) باستخدام مقياس القدرة على سحب الشوارد الحرة (DPPH). تم فحص المركبات النشطة بيولوجيا بواسطة الكروماتوغرافيا السائل مع قياس الطيف الكتلي الترادفي (LC-MS / MS). تم تحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) والحد الأدنى لتركيز مبيد للجراثيم (MBC) لعسل Trigona بطريقة تخفيف الوسط. تم إجراء اختبار تكوين الأغشية الحيوية ل P. aeruginosa و S. pyogenes باستخدام microtiter plates.. تم تحديد قدرة التحلل للأغشية الحيوية المنشأة بعد تعرض البكتيريا المختبرة ل 20٪ من عسل Trigona. تم قياس مستوى التعبير عن الجينات المرتبطة بالأغشية الحيوية في P. aeruginosa و S. pyogenes بعد العلاج ب 20٪ من عسل Trigona بواسطة microarray . تم تحديد الجينات المستهدفة لتحلل الأغشية الحيوية في P. aeruginosa بما في ذلك PelA و RsmA و FimW و WspA و PslF و HptB و Alg44 و BifA عن طريق اختبار reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR). كان TPC في عسل تريجونا هو 663.19 مجم GAE / كجم وكانت قيمة IC50تساوي  61.042 ± 0.45 مجم / مل. تم استنتاج علاقة سلبية كبيرة بين IC50 ومحتوى البوليفينول (p ≤ 0.01). أظهر التحليل الكروماتوغرافي تركيزات عالية من المركبات الفينولية والفلافونويد وخاصة كويرسيتين. أظهر عسل Trigona قيم MIC و MBC بنسبة 20٪ و 25٪ على التوالي ضد كلتا السلالتين البكتيرية. نجح عسل Trigona في تحلل 45.67٪ و 61.94٪ من الأغشية الحيوية P. aeruginosa و S. pyogenes ، على التوالي. كشف تحليل Microarray ل P. aeruginosa عن ارتفاع في تعبير 2607 جينا ، وانخفاض في تعبير 3478 جينا من بينها 470 جينا مرتبطا بالأغشية الحيوية. أدى انخفاض التنظيم في مستوى التعبير ​​​